1.0目标

用生物指示剂验证高压灭菌器的灭菌效率。

2.0范围

该程序适用于安装在质量控制实验室微生物区域内的高压灭菌器。

3.0责任

3.1工作：技术助理（微生物学家）/行政人员
3.2检查：行政人员/经理

4.0问责制

系主任

5.0程序

5.1频率：一年两次
5.2有机体：嗜热芽孢杆菌芽孢。（认证强度10 6）
5.3对批次/批次中用于验证目的的一条条状嗜热芽孢杆菌孢子进行初步计数。
5.4孢子的初始计数：
5.4.1将试纸条无菌转移至100 ml无菌生理盐水中，保持1/2小时并进行热震，将试管在70°C-80°C的水浴中放置15分钟。
5.4.2用手掌摇动或涡旋震荡试管以使孢子悬浮液均匀化
5.4.3根据初始计数，在无菌生理盐水中进一步稀释
5.4.4以不同的稀释度一式两份取每个等分试样，使菌落计数不超过300 cfu /板。
5.4.5将已融化并冷却至45°C至50°C的SCD琼脂培养基倒入分配的板中，使其涡旋并使其固化。
5.4.6将平板倒置放置在55±2°C下孵育48-72小时。
5.4.7计算每个板的菌落数，并使用稀释倍数计算平均数/条。
5.4.8如果初始计数不超过标签声明的150％且不小于标签声明的75％，则将试纸条用于验证目的。
5.4.9在Annexure-I中记录结果
5.5高压灭菌器验证
5.5.1在高压灭菌器腔室中装入配件和玻璃器皿。
5.5.2服用要求没有。条状标签，贴上标签并按如下所述放入高压灭菌锅内。
5.5.3将试条放在培养皿中，分别按照双门和竖式高压灭菌器附件III和IV中给出的位置图将其放置在高压灭菌器中。
5.5.4保持一条未暴露的带正控制。
5.5.5按照SOP（对于立式高压灭菌锅）和SOP（对于双门高压灭菌锅），在121°C和15磅压力下运行高压灭菌锅循环20分钟。
5.5.6循环结束后，取出所有试纸。
5.5.7在无菌SCD（大豆酪蛋白消化）培养基试管（10毫升）上标记位置，日期和设备ID号。将试纸条无菌转移到相应的标记SCD培养基试管中。
5.5.8将一根未曝光的胶条转移到SCD介质管中，并将其标记为“阳性对照”。
5.5.9保持一根未接种的SCD培养基管进行阴性控制。
5.5.10将所有试管在55°C±2°C下孵育14天。
5.5.11每天观察试管，直到有条带的SCD中试管，直到14天为止浑浊/生长。
5.5.12正面控制应在72小时内显示出生长。

5.6解释
5.6.1如果在任何SCD培养基试管中均未观察到生长，则表明设备性能令人满意。
5.6.2如果在任一SCD培养基试管中观察到生长，请鉴定进行革兰氏染色的嗜热脂肪芽孢杆菌的生长，同时将其与阳性对照进行比较。万一发生故障，请检查是否违反验证规定，并停止使用设备。同时，纠正原因并执行重新验证。符合规定后，设备可用于常规用途。并重复循环。
5.6.3维护确认记录并粘贴符合以下条件的校准卡。
设备名称：
身份证号码：
验证频率：
验证
日期：验证的截止日期：
验证者：
5.7将结果记录在Annexure-II中附上灭菌周期记录图和报告。

6.0缩写

SCD =
大豆酪蛋白消化N.盐水=生理盐水
小时=小时
cfu =菌落形成单位
B. =芽孢杆菌
ml =毫升
％=百分比
° C =摄氏度
USP =美G药典
＆=和
SOP =标准操作程序