验证方案
目 录
1. 概述
2. 验证目的
3. 验证范围
4. 支持文件
5. 验证项目小组成员与职责
6. 验证计划安排
7. 验证参数及判断标准
8. 验证内容
9. 偏差及变更处理
10.验证结果评价
11.验证结论
12.再验证周期
13.验证结果的实施
14.附录
1.概述
LDZX-75KBS
立式压力蒸汽灭菌器是利用高压高温湿热蒸汽杀死细菌。其体积小，受热均匀，是用于食品和药品微生物检查中培养基、微生物检查用器具、衣物的灭菌消毒。
灭菌器的灭菌效果直接影响到样品微生物检查结果的准确性和可靠性。因此，对于
灭菌器的验证应是定期且必要的。
2.验证目的
验证LDZX-75KBS
立式压力蒸汽灭菌器灭菌效果的有效性和可靠性。确保灭菌条件定在121±1℃、15分钟条件下，对所需灭菌物品能够进行有效的灭菌，从而保证卫生学检查结果的可靠性。
3.验证范围：
LDZX-75KBS
立式压力蒸汽灭菌器性能确认。（压力表经过校验合格）
4.支持文件
LDZX-75KBS立式压力
蒸汽灭菌器操作规程 文件编号
×××型隔水式恒温培养箱操作规程 文件编号
×××垂直层流洁净工作台操作规程 文件编号
×××型电热恒温鼓风干燥箱操作规程 文件编号
生物指示剂说明书
5.验证项目小组成员与职责
验证
项目小组 |
职务 |
部门 |
职责与岗位 |
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组长 |
质量部 |
负责检验结果的**后评价和验证方案的审核；负责整个验证的组织及评价（质量部 经理） |
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组员 |
质量部 |
验证方案的起草；相关的取样及检验；检验结果判断（质量部 QC） |
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组员 |
质量部 |
负责验证过程和验证结果的复核（质量部 QC） |
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组员 |
工程部 |
负责灭菌锅安装确认和维修（工程部 主管） |
6.验证计划安排
本次验证由质量部计划在 年 月 日～ 年 月 日 分三次进行验证。
7.验证参数及判断标准
参考依据：JJF1101-2003《环境试验设备温度、湿度校准范围》。
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项目 |
温度试验设备 |
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温度范围 |
（0～100）℃ |
（-60～0）℃/（100～200）℃ |
（200～300）℃ |
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温度偏差 |
±1.0℃ |
±2℃ |
±3℃ |
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湿度偏差 |
— |
— |
— |
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均匀度 |
温度 |
1.0℃ |
2℃ |
3℃ |
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湿度 |
— |
— |
— |
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波动度 |
温度 |
±0.5℃ |
±0.5℃ |
±2℃ |
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湿度 |
— |
— |
— |
#p#分页标题#e#
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验 证 参 数 |
判 断 标 准 |
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安装确认 |
安装所需电源，供水情况，人员培训和校验应符合规定 |
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运行确认 |
空载条件下，各项功能应与操作说明相符，且控温良好 |
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热分布测试 |
灭菌器腔内热分布应符合规定（±2℃） |
|
热穿透试验 |
满载条件下，灭菌器腔内热空气穿透力应符合规定（±2℃） |
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生物指示剂试验 |
根据颜色判断灭菌效果，培养48小时后, 阳性对照的培养液颜色由紫色变成黄色，灭菌过培养液颜色不变，则此灭菌程序符合规定 |
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若阳性对照的培养液颜色由紫色变成黄色，灭菌过培养液颜色如由紫色变成黄色，则此灭菌程序不符合规定 |
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若阳性对照的培养液颜色不变，则本次实验无效，必须重新进行试验 |
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如已灭菌的生物指示剂经培养显阳性，必须对灭菌程序重新选择，直**符合规定 |
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营养试验 |
营养琼脂培养基上应无菌落生长 |
8.验证内容
8.1 LDZX-75KBS立式压力
蒸汽灭菌器简述
灭菌器的工作压力为0.155MPa，安全阀**高工作压力为0.178 MPa±0.014 MPa。生产厂家：上海
申安医疗器械厂
8.2 安装确认
8.2.1目的
检查确认设备的资料是否齐全，整个安装过程是否符合设计规范要求，制定设备校验、使用SOP并纳入文件管理系统。
确认对操作人员进行操作培训并考核，纳入培训档案。
8.2.2资料档案
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名称 |
编号 |
存放处 |
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使用说明书 |
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备件清单 |
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合格证 |
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开箱验收记录 |
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设备安装调试验收单 |
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设备卡 |
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8.2.3安装确认
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项目 |
安装要求 |
实际情况 |
结果 |
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电源功率 |
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供电电源 |
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安装场所 |
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供水情况 |
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8.2.4 操作规程
编制LDZX-75KBS立式压力
蒸汽灭菌器操作规程。
8.2.5人员培训：对操作人员进行操作培训并考核，纳入培训档案。
8.3仪器校验
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名称 |
校验单位 |
校验日期 |
有效期 |
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LDZX-75KBS立式压力蒸汽灭菌器 |
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安装确认结论：
#p#分页标题#e#
记录人： 复核人： 日期：
8.4运行确认
8.4.1测试目的：在不加载样品的情况下试运行设备，确认灭菌器的各个部分在空载状态下功能正常，与操作说明书相关条款相符，运行达到灭菌条件后，控温功能良好。
8.4.2测试过程：各项操作准备就绪后，按照标准操作程序进行操作，设备运行后，各项功能和操作说明应相符，无明显偏差。
测试人： 测试日期：
在121℃保温15分钟，控温功能应良好，无明显偏差。
测试人： 测试日期：
8.5热分布测试
测试目的：检查灭菌器腔内的热分布情况，检查箱腔内可能存在的冷点。
8.5.1验证仪器的校正
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验证仪器 |
留点温度计 |
型号 |
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校验单位 |
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校验结果 |
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校验日期 |
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有效期 |
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结论 |
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8.5.2空载热分布
测试过程：取15支经过校验的留点温度计，将其中1支的探头置于灭菌器的蒸汽进气口处，1支探头置于灭菌器排气口处，1支探头置于灭菌器的温度控制和记录的探头旁边，其余留点温度计的分布在腔内的各处?？裘鹁鳎凑毡曜汲绦蚪校诵泄讨屑锹家瞧鞲鞲龅愕奈露龋诵?次，检查其重现性。
探头分布图：
上
下
刚到121℃时,各留点温度计温度
（表格数据单位℃；标准121℃±2℃，三次测量偏差±0.5℃）
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编号 |
1 |
2 |
3 |
4 |
5 |
6 |
7 |
8 |
9 |
10 |
11 |
12 |
13 |
14 |
15 |
|
**次 |
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第二次 |
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第三次 |
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121℃稳定15分钟时各留点温度计温度#p#分页标题#e#
（表格数据单位℃；标准121℃±2℃，三次测量偏差±0.5℃）
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编号 |
1 |
2 |
3 |
4 |
5 |
6 |
7 |
8 |
9 |
10 |
11 |
12 |
13 |
14 |
15 |
|
**次 |
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第二次 |
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第三次 |
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8.5.3运行结果：
记录人： 复核人： 日期：
8.5.4满载热分布
8.5.4.1测试过程：将灭菌器内装满内有300ml培养基的500ml锥形瓶，自下而上摆放。取15支经过校验合格的留点温度计，将1支的探头置于灭菌器的蒸汽进气口处，1支探头置于灭菌器排气口处，1支探头置于灭菌器的温度控制和记录的探头旁边，其余留点温度计的分布在腔内的各处?？裘鹁?，按照121℃，15分钟运行，运行过程中记录各个点的温度。连续运行3次，以检查其重现性。温度计分布同空载热分布
（表格数据单位℃；标准121℃±2℃，三次测量偏差±0.5℃）
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编号 |
1 |
2 |
3 |
4 |
5 |
6 |
7 |
8 |
9 |
10 |
11 |
12 |
13 |
14 |
15 |
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**次 |
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第二次 |
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第三次 |
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8.5.4.2运行结果： #p#分页标题#e#
记录人： 复核人： 日期：
8.6热穿透试验
热穿透试验是在热分布试验的基础上，确定装载中的“**冷点”，并肯定该店在灭菌过程中的无菌保证值，在121℃，FH≥15分钟。
8.6.1验证步骤
8.6.2装载类型：**大装载、满载。
8.6.3器皿选择：500ml锥形瓶。
灭菌程序：121℃×15分钟。
8.6.4测试过程：在满载情况下，取15支经过校验合格的标准留点温度计，将1支置于进气口处的待灭菌瓶内，1支置于排气口处的待灭菌瓶内，1支置于灭菌器温度计测试点旁，其余温度计置于待灭菌瓶中（如热均匀分布图）。
（表格数据单位℃；标准121℃±2℃，三次测量偏差±0.5℃）
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编号 |
1 |
2 |
3 |
4 |
5 |
6 |
7 |
8 |
9 |
10 |
11 |
12 |
13 |
14 |
15 |
|
**次 |
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第二次 |
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第三次 |
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8.6.5运行结果：
记录人： 复核人： 日期：
8.7性能确认：
8.7.1验证所涉及设施
8.7.1.1 LDZX-75KBS立式
压力蒸汽灭菌器
8.7.1.2 ×××型隔水式恒温培养箱
8.7.1.3 ×××垂直层流洁净工作台
8.7.1.4 ×××型电热恒温鼓风干燥箱#p#分页标题#e#
8.7.1.5生物指示剂—嗜热脂肪芽孢杆菌（ATCC 7953）（Bacillus Stearothermophilus） 为安瓿装紫色培养液含菌。
相关参数：
8.7.2仪器仪表校验要求
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名 称 |
校验单位 |
校验
结论 |
校验
日期 |
有效期 |
LDZX-75KBS立式压力蒸汽
灭菌器 |
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×××型隔水式恒温
培养箱 |
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×××型电热恒温
鼓风干燥箱 |
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8.7.3验证方法
8.7.3.1细菌生物指示剂验证
8.7.3.1.1取15支嗜热脂肪芽孢杆菌指示剂，均匀分布于灭菌器的各层位置，其中3支置于热穿透试验的**冷点，按照操作规程进行灭菌操作，温度121℃，灭菌时间15分钟。
8.7.3.1.2经过一个灭菌周期后，取出嗜热脂肪芽孢杆菌指示剂，放入培养箱中，在56～60℃培养箱中培养48小时，同时放1支未经灭菌处理的生物指示剂（编号：16）进行培养作为阳性对照。连续试验三次。(“-”表示结果呈阴性；“+”表示结果呈阳性。)
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次数 |
编号 |
1 |
2 |
3 |
4 |
5 |
6 |
7 |
8 |
9 |
10 |
11 |
12 |
13 |
14 |
15 |
16 |
|
**次 |
结果 |
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第二次 |
结果 |
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第三次 |
结果 |
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8.7.3.1.3结果判定及评价： #p#分页标题#e#
。
（每次检测中，每支嗜热脂肪芽孢杆菌指示剂呈蓝紫色为合格，指示剂之一呈黄色为不合格）。
记录人： 复核人： 日期：
8.7.3.2灭菌后培养基质量验证
8.7.3.2.1按照《微生物限度检查操作规程HZBSN-02-6》规定的检查方法，从灭菌后的营养琼脂培养基（厂家： ，批号 ）中每次取出12瓶（注意从灭菌器的不同位置）分别倾注平皿，同时做空白，35℃±1℃培养3天，记录菌落生长情况。连续检查3次。
（表格数据单位个/皿。）
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平皿号 |
1 |
2 |
3 |
4 |
5 |
6 |
7 |
8 |
9 |
10 |
11 |
12 |
空白 |
|
**次 |
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第二次 |
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|
第三次 |
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8.7.3.2.2验证结果：
记录人： 复核人： 日期：
8.8结论：
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验证项目 |
结论 |
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安装确认 |
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运行确认 |
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热分布测试 |
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热穿透试验 |
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生物指示剂试验 |
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|
营养试验 |
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#p#分页标题#e#
9.偏差及变更处理
验证过程中出现偏差时即使向验证小组组长报告，纠偏措施经验证小组组长同意并报质量部经理及验证总负责人同意后执行。如情况紧急，可由验证小组组长和QA员确认后执行纠偏措施，事后报质量部经理及验证总负责人。出现偏差不进行纠偏，对验证结果有严重影响的应取消验证结果，重新验证。验证过程中如需变更验证方案，按《验证管理规程》执行。
10.验证结果评价
验证小组负责根据验证情况，作出评定，依据《验证管理规程》写出验证报告。
11.验证结论
验证结束后，验证小组根据验证结果，得出验证结论，按《验证管理规程》颁发证证书。
12.再验证周期
由验证小组根据验证结果拟定再验证周期。
13.验证结果的实施
验证结果的实施见《验证管理规程》。
14.附录
附录1：验证合格证书
附录2：培养基配制及使用记录（HZBSJ-02-1-1）。
