这是一个难以实现且难以证明的条件。尽管有许多化学物质（无机和有机）可以杀死微生物，但它们可能并不完全有效，并且会留下不良或有毒的残留物。

紫外线和电离辐射也是有效的杀菌剂，破坏或修饰DNA以防止复制，但是紫外线不会产生有效的结果，也无法轻松验证湿热（蒸汽）灭菌可以提供的效果。如果jue对需要无菌，那么今天的科学家们就像他们的前任一样，开始蒸蒸日上。

随着周围环境温度的升高，微生物趋于变得更加活跃，-大多数（但不是全部）微生物死于176 o F 以上。对于Pr病毒，灭活的温度和时间要求要高得多。蒸汽分子凝结在较凉的微生物上，每克蒸汽转移2500焦耳，非常有效地将微生物加热到被破坏的温度。其他加热方法的缺点是，干燥热气体的热传递要低得多，边界层效应会隔离和保护微生物。

为了zui大程度地发挥作用，蒸汽必须处于饱和状态，并且可以轻松监控此条件以及蒸汽的温度和压力，从而有助于证明已发生灭菌。通过采用蒸汽灭菌技术，可以达到很高的无菌水平，实验室和医院使用的zui受欢迎的设备是蒸汽灭菌器或高压灭菌器。