加水→加物→密封→排气加热→灭菌→降温取物→结束 1. 加水：将内桶取出，再向外层锅内加入适量的水（接近外锅底边上的内桶支架），以防无加水或少加水引起炸裂事故； 2. 加物：放回内桶，装入待灭菌物品； 

3. 密封：加灭菌锅盖，并将盖上的排气软管插入内桶的排气槽内；将锅盖与锅对齐，以两两对称的方式同时旋紧相对的两个镙栓，使镙栓松紧一致（不要太紧），勿使漏气； 4. 排气加热：选择变压器电压（一般选择200V），后插上电源，打开排气阀；水沸后，排尽锅内冷空气（大量蒸汽排出时，维持1～3min），关上排气阀； 

5. 灭菌：当锅内温度升到所需温度时（一般121℃），控制热源（拔掉电源，调电压为110V），维持温度**所需时间（一般15～30min）； 

6. 降温取物：切断电源，当灭菌物品为敷料、器械和器皿时，可直接打开排气阀；若为溶液、培养基，则必须让灭菌锅温度自然下降，当压力降为“0”时，才可打开排气阀；旋松镙栓，打开盖子，取出灭菌物品；  

7. 结束：清洗内桶，排干外层锅内水，放回内桶，恢复常态。