高压灭菌锅属于强检仪器, 必须进行灭菌效果的验证。高压灭菌锅使物品灭菌后达到无菌要求,这是微生物实验成功的一个基本保证。将嗜热芽抱杆菌纸片用无菌镊子放人封闭试管中, 化学指示卡和留点温度计放人敞口的试管中, 以上两种试管各准备5-10支, 分别放置在高压灭菌锅蒸汽口处、底部排气口处及底部出水口处或上下左右中间5处。

留点温度计标化合格后可用于验证试验。检测前, 需将温度计的水银柱甩**40℃ 以下。

每次监测后留点温度计的温差应在1℃之间,则说明灭菌锅内的温度分布是均匀的。

灭菌后的菌片应在严格无菌操作条件下放人灭菌后的澳甲酚紫陈水培养基内, 50-60℃ 培养24-48小时, 观察颜色变化。如培养基变为黄色,说明菌片中的嗜热芽抱杆菌尚未完全灭活, 细菌仍可在培养基中生长, 分解葡萄糖产酸变为黄色。如培养基颜色不变化仍为紫色, 则说明芽抱杆菌已灭活。同时要用未经灭菌的纸片放人培养基内作为阳性对照, 不加纸片的空白培养基作为阴性对照。

化学指示卡上的指示色块, 在高压蒸汽灭菌时, 由淡黄色变为黑色。随着颜色变化的深浅, 并与对照色相比, 可判断灭菌效果是否达到要求。化学指示卡应在干燥处保存。遇潮会变色, 影响灭菌效果的观测。

高压蒸汽灭菌必须使蒸汽顺利进人灭菌锅内,与灭菌物品接触, 并将原有的冷空气排出方可达到灭菌的效果。要进行空载热分布和(满载热穿透力验证满载时不超过总体积的2/3)。两种验证各重复三次。

5个点六次试验表明温度均在121℃ , 化学指示卡变黑程度与对照色一致培养基均未改变颜色, 说明高压蒸汽灭菌效果合格。